4D-Nucleofector System(核轉(zhuǎn)染系統(tǒng)),可用于免疫細胞、神經(jīng)細胞、干細胞、內(nèi)皮細胞等比較難轉(zhuǎn)染的原代細胞和各類細胞系。
Lonza Nucleofector細胞核轉(zhuǎn)染技術(shù)(原Amaxa Nucleofector),由核轉(zhuǎn)染儀器、試劑盒、根據(jù)細胞類型優(yōu)化的轉(zhuǎn)染方案共同構(gòu)成,其根據(jù)特定細胞設(shè)計的電脈沖參數(shù)、特殊電轉(zhuǎn)緩沖液,擊穿細胞膜和核膜,使包括DNA、RNA等外源物質(zhì),不但可以進入細胞質(zhì)還可直接進入細胞核,大幅提高傳統(tǒng)電穿孔的轉(zhuǎn)染效率, Nucleofector面世以來,已成為動物細胞高效轉(zhuǎn)染代表性技術(shù),成功應(yīng)用于CAR-T、RNAi、CRISPR文庫等,推動基因治療、細胞治療等相關(guān)研究的進步。
4D-Nucleofector核轉(zhuǎn)染系統(tǒng),采用模塊化設(shè)計,每個功能模塊可單獨配置,滿足多種通量和細胞數(shù)量的要求:
①(必備)C模塊(Core unit),又稱核心模塊,提供電脈沖和轉(zhuǎn)染程序;
②(可選)X模塊(X unit),提供2個電轉(zhuǎn)杯位置、1個16孔電轉(zhuǎn)板條位置 ,用于1~16個樣品中低通量,2E4~2E7細胞數(shù)量的轉(zhuǎn)染;
③(可選)Y模塊(Y unit),提供一個24孔電轉(zhuǎn)板位置,用于貼壁細胞不需消化的原位轉(zhuǎn)染;
④(可選)96孔模塊(96-well unit),提供1個96孔電轉(zhuǎn)板位置,用于1~96個樣品中高通量,1E4~1E6細胞數(shù)量轉(zhuǎn)染;
⑤(可選)LV模塊(LV unit),提供1個20mL電轉(zhuǎn)盤位置,用于1個樣品低通量、1E7~1E9細胞數(shù)量轉(zhuǎn)染。
-采用高分子聚合物電極,避免傳統(tǒng)鋁電極的離子毒害,維持細胞生理狀態(tài),提高活率。
-轉(zhuǎn)染后可快速觀察實驗結(jié)果,例如轉(zhuǎn)染GFP后2小時可觀察到蛋白。
-無需自己優(yōu)化條件,擁有超過650種細胞類型的現(xiàn)成程序,可直接使用,全球共享數(shù)據(jù)庫,超過1500條轉(zhuǎn)染數(shù)據(jù)可供參考。
-可轉(zhuǎn)染包括DNA、mRNA、miRNA、siRNA、RNP、肽、蛋白質(zhì)在內(nèi)的多種底物。
-可用于難以轉(zhuǎn)染的原代細胞、干細胞、神經(jīng)元、細胞系。
-可不用消化細胞,進行貼壁細胞的原位轉(zhuǎn)染。
-靈活的轉(zhuǎn)染規(guī)??s放,可在低、中、高通量中輕松轉(zhuǎn)移,實現(xiàn)2×10^4至1×10^9個細胞數(shù)量的輕松擴展。
-已在全球8000多家同行評議的出版物中發(fā)表。
4D-Nucleofector核轉(zhuǎn)染系統(tǒng)已廣泛應(yīng)用于通過RNAi、CRISPR-Cas9、CRISPR-Cas12a進行的基因敲除研究、以及iPS誘導多能干細胞、CAR-T的研究中。
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