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德國賽多利斯的Incucyte®

一款能夠在培養(yǎng)箱中對活細(xì)胞健康、形態(tài)、運(yùn)動及功能進(jìn)行全面分析的儀器。

腫瘤、干細(xì)胞、神經(jīng)發(fā)育中的功能評價等細(xì)胞基礎(chǔ)研究工作中，需要對細(xì)胞進(jìn)行多種指標(biāo)檢測。傳統(tǒng)的細(xì)胞檢測基于終點(diǎn)法，利用吸光度檢測、某一時間圖片拍攝、流式技術(shù)檢測等片段的圖像和數(shù)據(jù)解釋細(xì)胞狀態(tài)及功能分析，在操作環(huán)節(jié)和數(shù)據(jù)處理上面有難以避免的誤差，不得不開展大量的重復(fù)驗(yàn)證工作，極大的浪費(fèi)了實(shí)驗(yàn)資源和周期，且仍不能確定最終的數(shù)據(jù)是否準(zhǔn)確。

賽多利斯Incucyte®實(shí)時活細(xì)胞分析系統(tǒng)能夠動態(tài)地了解所培養(yǎng)細(xì)胞的健康狀況、形態(tài)、運(yùn)動和功能，以便快速獲得新的見解，推動研究進(jìn)展！

今天就先給大家介紹Incucyte®在類器官培養(yǎng)QC的應(yīng)用：

Incucyte®應(yīng)用小站 | 類器官培養(yǎng)QC

體外3D培養(yǎng)為人類疾病轉(zhuǎn)化研究、疾病建模、再生醫(yī)學(xué)和精準(zhǔn)治療打開了新視野。目前，分化的器官細(xì)胞類型可以在體外由不同的干細(xì)胞體（SCs）產(chǎn)生，以模擬復(fù)雜的組織，同時保留基因組穩(wěn)定性和對藥物治療的反應(yīng)性。

因此，類器官比傳統(tǒng)的2D培養(yǎng)具有更明顯的優(yōu)勢，在各種創(chuàng)新應(yīng)用中具有前所未有的潛力。然而，為了利用這些模型進(jìn)行有意義的基礎(chǔ)研究、疾病建模和藥物篩選，需要可靠、特異的培養(yǎng)和分析方法。目前，類器官培養(yǎng)的表征和優(yōu)化受限于對3D結(jié)構(gòu)隨時間變化的監(jiān)測及類器官形成的重復(fù)性。

_	缺乏經(jīng)過驗(yàn)證的方案，用于在每個孔中重復(fù)性的形成類器官，及數(shù)據(jù)通量低
_	耗時，需要手動操作獲取類器官圖像
_	需要用第三方軟件做分析——定量信息有限
_	在獲取類器官圖像時缺少環(huán)境控制，可能會引起實(shí)驗(yàn)結(jié)果的差異

Incucyte®類器官培養(yǎng)QC應(yīng)用提供一體化解決方案，包括經(jīng)過驗(yàn)證的方案和軟件模塊，用于實(shí)時查看和無標(biāo)記定量類器官，以優(yōu)化其培養(yǎng)條件。對類器官培養(yǎng)狀態(tài)做出明智的決定，打開高級細(xì)胞模型分析的新世界。

Incucyte^®類器官培養(yǎng)QC應(yīng)用

采用Incucyte^®活細(xì)胞成像和分析，在長達(dá)數(shù)天、數(shù)周甚至數(shù)月的時間內(nèi)，對多種組織樣本產(chǎn)生標(biāo)準(zhǔn)化、可重復(fù)的類器官數(shù)據(jù)。

Incucyte^®類器官培養(yǎng)QC應(yīng)用的主要優(yōu)點(diǎn)

自動定位和分析類器官

在穩(wěn)定的培養(yǎng)箱環(huán)境內(nèi)，通過Incucyte^®自動定位和定量類器官的分化和成熟，將類器官Q(mào)C流程自動化。

小鼠腸道類器官

小鼠胰腺類器官

在穩(wěn)定的培養(yǎng)箱環(huán)境中動態(tài)監(jiān)測和定量Matrigel^®domes中類器官的分化和生長。使用24孔板將小鼠腸道和胰腺類器官包埋在Matrigel^®domes（分別50%或100%Matrigel^®），用Incucyte^®實(shí)時監(jiān)測6-8天。明場視頻（接種2天后）和明場面積的時程曲線顯示細(xì)胞類型特異的類器官分化、形態(tài)和生長。

動態(tài)表征類器官形成

采用Incucyte^®類器官分析軟件模塊，在數(shù)周或數(shù)月的時間內(nèi)，自動分析整個Matrigel^®dome中類器官的大小和數(shù)目，以優(yōu)化培養(yǎng)條件。

如上圖所示，在明場模式下測量對象大小，以此區(qū)分培養(yǎng)擴(kuò)增的最佳條件。使用48孔板將小鼠肝臟器官以不同密度包埋在Matrigel^®domes（100%）。圖像（接種5天后）和時程曲線顯示類器官大小和生長速度與細(xì)胞數(shù)目正相關(guān)。

鑒定類器官培養(yǎng)的成熟階段

對類器官形態(tài)進(jìn)行無偏倚的評估，以確定類器官傳代或延長培養(yǎng)的最佳時間。

用綜合形態(tài)學(xué)指標(biāo)定義細(xì)胞類型特異性傳代頻率。腸道類器官傳代頻率取決于成熟標(biāo)志，如管腔內(nèi)出芽和碎片累積。用Incucyte^®的偏心率（出芽）或暗度（管腔內(nèi)碎片累積）指標(biāo)動態(tài)量化這些成熟標(biāo)志。

提高生產(chǎn)力

利用既定方案和一體化軟件模塊，對24孔或48孔板中嵌入Matrigel^®Domes的類器官進(jìn)行綜合分析。

上圖為經(jīng)過實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證的Incucyte^®類器官培養(yǎng)方案。用Matrigel^®Domes法輕松培養(yǎng)、擴(kuò)增和維持類器官，以獲得器官特異性生理表現(xiàn)。

Incucyte^®軟件采用向?qū)浇缑?，即使是初次使用者，也能輕松掌握。自動化的圖像采集和分析工具，讓使用者在實(shí)驗(yàn)設(shè)置后即可離開。遠(yuǎn)程查看24孔板或48孔板中類器官分化和生長情況，以實(shí)時監(jiān)測實(shí)驗(yàn)進(jìn)展。

Incucyte^®既能不受培養(yǎng)環(huán)境限制進(jìn)行活細(xì)胞觀察，又能實(shí)時分析得到動力學(xué)變化過程～今天先介紹到這里，更多的應(yīng)用請持續(xù)關(guān)注“Incucyte^®應(yīng)用小站系列”的介紹～